jizzjizz欧美69巨大,色先锋久久亚洲中文字幕,性欧美高清久久久久久久,看看小美女的小逼逼视频

銷售熱線

19126518388
  • 技術(shù)文章ARTICLE

    您當(dāng)前的位置:首頁 > 技術(shù)文章 > 消滅 PCR 非特異性擴(kuò)增的方法

    消滅 PCR 非特異性擴(kuò)增的方法

    發(fā)布時間: 2023-06-28  點(diǎn)擊次數(shù): 1986次
    非特異性擴(kuò)增,即進(jìn)行 PCR 所擴(kuò)增出來的條帶不是所要的,引物與模板在非目的條帶處有錯配,導(dǎo)致延伸產(chǎn)物不是目的條帶。例如引物二聚體,即引物在退火過程中產(chǎn)生了 hairpin 結(jié)構(gòu)或其他二級結(jié)構(gòu),或者引物在模板的某些位置非特異性地結(jié)合,也同樣會產(chǎn)生非特異性擴(kuò)增。PCR 產(chǎn)物都是通過引物延伸產(chǎn)生的。當(dāng)引物產(chǎn)生了二聚體或者非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物之后,引物本身就無法再延伸形成 PCR 產(chǎn)物了,這樣的情況下,非特異性擴(kuò)增產(chǎn)物越是多,那目的產(chǎn)物就越是少。如果在 qPCR 過程中,就會在熔解曲線中形成雙峰。

    消滅 PCR 非特異性擴(kuò)增的方法:
    1、引物設(shè)計(jì)的過程中要用 Primer premier 5.0 來驗(yàn)證一下二聚體;
     
    2、 引物合成后,先做一次梯度 PCR,檢測最合適的退火溫度,一般高退火溫度可以提高引 物對模板的特異性從而降低引物二聚體;
     
    3、 降低 Mg2+濃度,鎂離子濃度高,會導(dǎo)致大量的非特異性擴(kuò)增,但是沒有鎂離子的話,也會導(dǎo)致 Taq 酶的失活;
     
    4、降低 dNTP 濃度,dNTP 也是非特異性擴(kuò)增的一個罪魁禍?zhǔn)?,降低它的濃度,也能有效降低二聚體及其他非特異性擴(kuò)增;
     
    5、降低引物濃度,一般的 PCR 引物都是過量的,降低了引物濃度自然也能降低引物之間形成二級結(jié)構(gòu)的可能性;
     
    6、提高退火溫度,這個道理很簡單,引物的退火溫度提高,引物間的二級結(jié)構(gòu)形成可能性就會降低;
     
    7、延長退火時間,這個也可以減弱引物間結(jié)合的可能性;
     
    8、DMSO 及甜菜堿,這些 PCR 促進(jìn)劑,主要是用于 CG 含量高的模板上,降低 DNA 的二級結(jié)構(gòu)的產(chǎn)生,但根據(jù)經(jīng)驗(yàn),加入 DMSO 之后需要同時提高一點(diǎn)退火溫度來補(bǔ)平(qPCR 不太適用);
     
    9、熱啟動法,通過 95℃的高溫?zé)釂樱邷亟怄?,使得引物間的二級結(jié)構(gòu)破壞,以此降低二聚體產(chǎn)生。


    深圳安培生物科技有限公司,是一家具有核心的技術(shù)實(shí)力、壹流的經(jīng)營管理水平和完善的市場銷售體系的生物高科技企業(yè)??偛吭O(shè)在廣東,服務(wù)面向全國。安培生物集進(jìn)口試劑、實(shí)驗(yàn)室耗材銷售、技術(shù)服務(wù)與合約開發(fā)為一體的專業(yè)化高科技公司,旨在為生命科學(xué)的發(fā)展提供壹流的產(chǎn)品與服務(wù)。本公司建立了涵蓋分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、信號傳導(dǎo)和神經(jīng)科學(xué)等領(lǐng)域的產(chǎn)品供應(yīng)線,在各個領(lǐng)域內(nèi)向用戶提供世界前沿水平和質(zhì)量穩(wěn)定的產(chǎn)品,安培生物致力于為廣大的科研機(jī)構(gòu)、高等院校等優(yōu)質(zhì)客戶提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品、技術(shù)支持與服務(wù)。


產(chǎn)品中心 Products
亚洲xxxxxxxxx^| 国产精品一区二区av蜜佟| 在线观看无码免费你懂的| 短裙公车被直接进入被c| 男人天堂2018| 大屄日大屌在线黄色视频| 日韩AV无码就去五月天| 真实中国白妞配性BBW| 东北女人骚影院| 香蕉久久久久久av成人| 日韩精品亚洲不卡一区二区| 苍井空无码电影在线观看| 亚洲熟妇一区二区三个区| 啊啊啊啊啊美女黄色视频| 日韩高清无不码不卡视频| 伊人国产短视频| 日韩精品一区二区三区三州| 欧美操逼免费试看小视频| 亚洲av成人在线一区二区| 国产伦一区二区三区精品| 最新亚洲人无码播放网站| 亚洲日韩性欧美中文字幕| 怡红院日本一道日本久久| 老旺的大肉蟒进进出出视频| 亚洲色中文字幕在线激情| 大鸡巴操爆阴穴| 人妻久久久一区二区三区| 91久久国产热精品免费| 亚洲人成无码www久久久| 欧美成人WWW在线观看| 国产电影 一区二区三区| 久久只有这精品99一二| 日本aa免费电影一区二区| 午日日日夜夜夜| 国产精品粉色视频免费看| 女人的骚逼视频| 九九热九九这里只有精品| 五月丁香社区| 你想操我吗视频系列公司| a级毛片无码久久精品免费| 国产精品久久久免费99|