分享轉(zhuǎn)染小鼠胚胎成纖維細胞（NIH-3T3）siRNA文章(IF10.588)

轉(zhuǎn)染小鼠胚胎成纖維細胞（NIH-3T3）siRNA文章(IF10.588) 編輯

一、 轉(zhuǎn)染小鼠胚胎成纖維細胞（NIH-3T3），轉(zhuǎn)染siRNA文章概述：

當NIH/3T3細胞生長密度達到60%，在不含F(xiàn)BS培養(yǎng)基的六孔板中進行轉(zhuǎn)染。對于細胞轉(zhuǎn)染使用5μM pGPU6/GFP/Neo-shTRIM11,siALKBH5,miR-21a-5p mimic,miR-590–5p mimic, miR-361–3p mimic, miR-202–3p mimic和相應對照，使用 Advanced DNA/RNA轉(zhuǎn)染試劑(#AD600025 Zeta life, USA) 對細胞轉(zhuǎn)染；在轉(zhuǎn)染24小時后分別對TRIM11或ALKBH5通過蛋白質(zhì)印跡或qPCR檢測敲低效率。

二、其它

1、NIH/3T3細胞培養(yǎng)條件：文章選擇Z7181FBS-500胎牛血清培養(yǎng)(# Zeta life, USA)

2、文章作者：河北醫(yī)科大學公共衛(wèi)生學院毒理學教研室、河北醫(yī)科大學環(huán)境與健康重點實驗室

3、標題：FcγRIIB  The proteasome-dependent degradation of ALKBH5 regulates ECM deposition in PM2.5 exposure-induced pulmonary fibrosis of mice .(IF10.588)

轉(zhuǎn)染小鼠胚胎成纖維細胞（NIH-3T3）siRNA文章(IF10.588)編輯

三、轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染NIH-3T3細胞原文

轉(zhuǎn)染小鼠胚胎成纖維細胞（NIH-3T3）siRNA文章(IF10.588) 編輯

Cell transfection

Transfection was conducted when NIH/3T3 cells grown to 60% density in six-well plates with FBS absent medium. For cell transfection, 5 μM of pGPU6/GFP/Neo-shTRIM11, siALKBH5, miR-21a-5p mimic, miR-590–5p mimic, miR-361–3p mimic, miR-202–3p mimic and cor-responding control (Genepharma, Shanghai, China) was transfected into cells using Advanced DNA/RNA Transfection Reagent (Zeta life, USA) according to the supplier’s guidelines, respectively. TRIM11 or ALKBH5 knockdown efficiency was detected by western blotting or qPCR after 24 h post-transfection, respectively.

四、美國Zeta Life 公司與美國加利福尼亞大學舊金山校區(qū)聯(lián)合開發(fā)用于哺乳動物細胞、活體動物轉(zhuǎn)染的 Advanced DNA RNA 第三代多肽小分子轉(zhuǎn)染試劑，此技術(shù)成為新的蛋白功能、免疫細胞及干細胞治療、研發(fā)及生產(chǎn)的主要關(guān)鍵技術(shù)之一。

五、文章中所使用轉(zhuǎn)染試劑產(chǎn)品信息

產(chǎn)品名稱

Advanced  DNA RNA  轉(zhuǎn)染試劑

貨號

AD600025、AD600050、AD600075、AD600150

規(guī)格

0.25ML、0.5ML、0.75ML、1.5ML

安培生物科技有限公司是美國 Zeta Life 公司的中國代理商。

安培生物堅持為生命科學研究、活體動物轉(zhuǎn)染、大規(guī)模生物生產(chǎn)、基因和細胞治療領域客戶，提供*細胞體內(nèi)可代謝的核酸轉(zhuǎn)染試劑；inviCELL™Platelet lysate無動物血清產(chǎn)品旨在支持廣泛的細胞擴增和生產(chǎn)，包括培養(yǎng)間充質(zhì)干細胞和多種免疫細胞系等，為制藥公司或者生物技術(shù)公司提供無血清細胞培養(yǎng)規(guī)模生產(chǎn)服務；提供以植物生物為平臺基因序列全人源化、*的細胞培養(yǎng)可分解3D基質(zhì)膠產(chǎn)品；提供內(nèi)毒素≦ 1.0 EU/mL、對細胞無毒性影響、高純度的一型膠原蛋白產(chǎn)品。安培生物專注為生物醫(yī)藥領域提供優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和技術(shù)服務，努力發(fā)展為基因治療、細胞治療的生物科技企業(yè)。致力成為推動生命科學進步和值得信賴的合作者。