細胞培養(yǎng)常遇見問題集錦第五期，小編繼續(xù)與大家探討細胞培養(yǎng)時遇到哪些讓人煩惱的問題~

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問：請教一下大家，準(zhǔn)備從別的實驗室借一瓶細胞，20分鐘之內(nèi)可以拿到自己的實驗室，運輸?shù)臅r候可以培養(yǎng)瓶里充滿培養(yǎng)基，封口膜包緊，常溫放在泡沫盒里嗎？那拿到自己的實驗室后，在充滿培養(yǎng)基的情況下，倒掉一部分后，留10ml（25cm2皿）培養(yǎng)基繼續(xù)放培養(yǎng)箱培養(yǎng)就可以了對嗎？

答：可以，細胞沒那么脆弱。拿回來直接噴酒精扔進去就可以了。

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▲問：這個769p 腎癌細胞最近幾天細胞間隙有很多小黑點，是貼壁的，傳代也沒有用，是污染嗎？跟雙抗有關(guān)嗎？因為有些人不加雙抗養(yǎng)細胞，那主要還是考慮營養(yǎng)不夠的原因嗎？

答：看著很瘦，好像營養(yǎng)匱乏。

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▲問：請問這個細胞是污染了嘛？那請問同樣培養(yǎng)基同一盒槍頭只有一瓶污染了是怎么回事呢？那請問菌混在氣溶膠中應(yīng)該怎么滅菌呢？

答：這是酵母菌污染。菌的話可以通過紫外滅菌和過氧化氫熏蒸。

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▲問：上兩圖是不是人胚肺成纖維細胞MRC-5細胞污染了？用pbs洗洗不掉，而且越來越多，用的培養(yǎng)基是細胞公司那里購買的適配*培養(yǎng)基，才是第3次傳代，越傳越差，用的是不含EDTA的胰酶，之前說含EDTA的胰酶傳不了幾代細胞就不好了，但是不含EDTA的胰酶消化特別慢得7-8分鐘，時間短了吹不下來

答：好多死細胞，長時間不換液，肯定會變黃，應(yīng)該是細胞碎片，消化時間太長了，最好不超過5分鐘，可以分次消化，已消化的先傳皿，然后再消化還在貼壁的。

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▲問：這是什么污染嗎？

答：看不太清，有點像細胞碎片

▲問：胃黏膜上皮細胞，是細胞碎片還是污染？

答：可以用三抗搶救一下。

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